Coagulation tests

thumb|Přehled vyšetření hemostázy. thumb|300px|Schéma koagulace

Blood clotting, or hemocoagulation, is the third stage of stopping bleeding. The first phase is formed first by reflex, later by humoral stimulation of vasoconstriction. In the second phase, there is activation and adhesion of platelets and the formation of a primary (unstable) platelet thrombus. The third phase then includes the activation of the plasma coagulation cascade and the formation of a fibrin network stabilizing the thrombus.

More detailed information can be found on the Hemocoagulation page .

Indications for examination of blood coagulation

 * screening examination – before invasive procedures (surgery, biopsy, etc.)
 * suspected bleeding or thrombophilic conditions
 * monitoring of anticoagulant treatment – ​​Warfarin
 * an auxiliary indicator in the evaluation of hepatic proteosynthesis

Method
Blood is collected in a tube with EDTA or with citrate. These substances have the ability to bind calcium (form a complex with it) and thus prevent immediate blood clotting. The blood is sent without delay to the laboratory, where the fraction of blood cells is separated from the decalcified plasma by centrifugation. The required tests are then performed, e.g. aPTT, PT = Quick test, fibrinogen level or D-dimers.

APTT
APTT (activated partial thromboplastin time) is a test of the internal and common pathway of hemocoagulation.

Execution
At a temperature of 37°C, kaolin - cephalin complex (cephalin - phospholipid from rabbit brain) is added to the decalcified plasma along with an excess of calcium ions. Here, kaolin represents a negatively charged surface that activates the internal pathway, and cephalin functions as a partial thromboplastin (it has nothing to do with tissue thromboplastin!), i.e. actually a substitute for platelet phospholipid, necessary for the activation of factor X. In this way, the internal and then the common pathway is activated. The time until the formation of a fibrin clot is measured.

Physiological values

 * 25,9–40 s
 * APTTR = value for comparison with standard plasma parameter is in the range of 0,83 - 1,3
 * APTT is mainly dependent on the initial events of hemocoagulation the internal pathway (f. XII, XI, IX and VIII), because this part of coagulation takes place more slowly. Only in the second row does it capture the effectiveness of the factors of the common path, X, V, II and I.

Prolongation

 * hemophilia A (f. VIII deficiency), hemophilia B (f. IX deficiency), hemophilia C (f. XI deficiency);
 * i.v. heparin treatment, but not with fractionated heparin sc - heparin increases the effectiveness of the physiological anticoagulant antithrombin III, which inhibits factors XII, XI, IX, X, II and VII. Except for f. VII, all these changes are included in the APTT. Heparin also directly affects factor X activity;
 * Warfarin treatment ;
 * von Willebrand's disease – a hereditary disorder of vW factor production, which is a carrier of factor VIII and thus affects its activity;
 * antiphospholipid syndrome – presence of antibodies against phospholipids;
 * consumptive coagulopathy – DIC

Prothrombin time
right|náhled|Účinek warfarinu PT (prothrombin time, TT (thromboplastin time)) is a test of the external and common pathway. It indicates the rate of conversion of prothrombin to thrombin due to the action of tissue thromboplastin (coagulation factor III).

Execution
Tissue thromboplastin is added to the decalcified plasma along with an excess of calcium ions. In this way, the outer and then the common pathways are activated. The time until the formation of the first fiber of the fibrin clot is measured. The results of the test are usually indicated by the INR index ( international normalized ratio), i.e. the ratio of the patient's measured time and the normal value of the control plasma. Commercially available types of tissue thromboplastin (tissue factor III) differ among themselves. Therefore, the efficiency factor of the thromboplastin used is added to the equation for calculating the INR.

Fyziologické hodnoty

 * 12–15 s
 * INR: 0,8–1,2 (80–120 %)

Výsledný čas závisí na koncentraci jednotlivých koagulačních faktorů zevního i společného systému. Při zvýšené srážlivosti krve je INR nižší, při prodloužené srážlivosti (např. při léčbě antivitaminem K) se INR zvyšuje.

Prodloužení

 * fyziologicky u novorozenců – nedostatek faktoru VII;
 * terapie Warfarinem nebo jiné stavy s hypovitaminózou K;
 * terapie heparinem i.v.;
 * těžká porucha jaterní proteosyntézy;
 * konsumpční koagulopatie – DIC.

Další vyšetření

 * Metoda Lee-White:


 * Orientační metoda vyšetření koagulace u lůžka pacienta, která má minimální klinické využití. Princip testu spočívá ve spontánní aktivaci vnitřní koagulační kaskády in vitro (ve zkumavce). Výsledek je závislý na stavu vnitřní větve a společného koagulačního systému.
 * Normální čas je: 5–15 min při pokojové teplotě.


 * Celkové degradační produkty fibrinu


 * FDP (fibrinové degradační produkty) a D-dimery jsou specifické pro stabilizovaný fibrin (norma pod 160 μg/l).
 * Imunologické stanovení degradačních produktů fibrinu sleduje proteiny akutní fáze. Je ukazatel aktivované fibrinolýzy, z diagnostického hlediska především marker recentně nastartované koagulace s následnou fibrinolýzou. Využívá se především při podezření na trombembolickou nemoc. Vysoká senzitivita metody je ovšem na úkor její specificity. Lze ji také použít při sledování léčby, při které se snažíme u pacienta navodit rozpouštění trombů.


 * Koncentrace fibrinogenu:


 * Označuje se jako Fbg. Jedná se o stanovení plazmatické koncentrace fibrinogenu. Norma je mezi 1,5–4,5 g/l.


 * Antitrombin III:


 * Stanovení funkční aktivity v plazmě, normální rozmezí dáno porovnáním s kontrolní plazmou (70–100 %). Primární nebo sekundární (konzumpce u DIC) deficit antitrombinu&thinsp;III představuje rizikový faktor trombofílie.


 * Trombinový čas:


 * Trombinový čas (TT, thrombin time) je přímé vyšetření konverze Fbg na fibrin.
 * Provedení: do dekalcifikované plasmy přidán trombin spolu s nadbytkem kalcia. Měří se čas do vzniku fibrinové sraženiny.
 * Fyziologické rozmezí je 17–24 s.
 * Prodloužen při dysfibrinogenemii, těžké hypo- nebo afibrinogenemii, aktivované fibrinolýze a při léčbě heparinem.


 * Euglobulinová metoda stanovení fibrinolytické aktivity:


 * Z plazmy se vysráží v izoelektrickém bodě kyselinou octovou euglobulinová frakce, obsahující plazminogen. Frakce se oddělí, rozpustí a znovu vysráží chloridem vápenatým. Přítomný plazmin, precipitací zbavený účinku α2-antiplazminu, lyzuje vzniklou sraženinu. Při aktivaci fibrinolytického systému je přítomno více aktivovaného volného plazminu a lýza sraženiny je rychlejší.
 * Fyziologický čas lýzy je 120–240 minut. Kratší časy signalizují zvýšenou aktivaci fibrinolytického systému.


 * Aktivovaný koagulační čas (ACT):


 * Krev odebraná bez antikoagulancia se aplikuje do zkumavky s kontaktním aktivátorem (kaolin) a v přístroji je při 37 °C míchána do odečtení času koagulace. Rutinní pro kontrolu heparinizace při mimotělním oběhu a hemodialýze. ACT normální krve je cca 150 s, při heparinizaci pro dlouhodobý mimotělní oběh nebo hemodialýzu 180−300 s, při MO v kardiochirurgii >&thinsp;600 s.


 * Další vyšetření:


 * vyšetření proteinu C, proteinu S, vyšetření APC rezistence (geneticky podmíněná rezistence faktoru V vůči aktivovanému proteinu C, představující rizikový faktor tromboembolické nemoci);
 * vyšetření antifosfolipidových protilátek – lupus antikoagulans, modifikované aPTT, antikardiolipinové protilátky;
 * vyšetření fibrinolytického systému – aktivátory plazminogenu (tPA, uPA, PAI-1), plazminogen;
 * vyšetření aktivity jednotlivých faktorů koagulační a fibrinolytické kaskády – dg. např. hemofilie A, B, C.

Zhodnocení vyšetření hemostázy
volně podle E. Lechlera

Související články

 * Krev
 * Krevní obraz
 * Hemokoagulace
 * Vyšetření krvácivosti

Externí odkazy

 * Fyziologický atlas – hemostáza